Ústav
Ústav anorganické chemie (101)
ID
2028-101-12
Vedoucí
Ing. Irena Hoskovcová, CSc.
Konzultant
RNDr. Milan Kožíšek, Ph.D. (UOCHAB AV)
Aktuální studijní programy
B105-Syntéza a výroba léčiv
Podstata a cíl práce
Hantaviry, včetně viru Andes, patří mezi původce závažných onemocnění s vysokou mortalitou, přičemž jejich léčba je dosud omezena na podpůrnou péči a schválená antivirotika neexistují. Endonukleasa virové RNA-dependentní RNA polymerasy je metaloenzym, jehož aktivita závisí na přítomnosti dvoumocných kovových iontů v aktivním místě, a je proto atraktivním cílem pro návrh inhibitorů s motivem pro chelataci kovu. Cílem práce je připravit rekombinantní endonukleasu viru Andes, biochemicky ji charakterizovat a vyvinout fluorescenčně polarizační metodu vhodnou pro hromadné testování inhibitorů. Tuto metodu pak využít k identifikaci látek schopných inhibovat enzym z knihovny sloučenin s metal-chelatačním motivem.
Náplň činnosti studenta
Student bude v rámci experimentální práce provádět přípravu rekombinantní endonukleasy viru Andes, tj. její expresi a purifikaci. Připravený protein bude charakterizovat, zejména stanoví jeho specifitu vůči kovovým iontům nezbytným pro katalytickou aktivitu. Následně vyvine a optimalizuje metodu hromadného testování pro screening inhibitorů endonukleasy založenou na fluorescenční polarizaci. Po jejím zavedení se student zapojí do screeningu knihovny sloučenin obsahujících motiv pro chelataci kovu a vyhodnotí jejich inhibiční potenciál.